2种 harpin 内源表达对短短芽孢杆菌 HAB －5菌株抑制和促生能力的影响

采用化学方法分别将来自水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv．oryzae）、棉花角斑病菌（X．citri subsp． malvacearum）hrp 基因簇中的 hpa1 Xoo、hpaXm基因转化至生防菌短短芽孢杆菌（Brevibacillus brevs）HAB －5菌株，测定2种 harpin 蛋白对短短芽孢杆菌抑菌和促生能力的影响，以期获得更高效的生防菌株。结果表明，获得转入 hpa1 Xoo的突变体581个，转入 hpaXm的突变体有650个；经 PCR 及 PCR Southern Blot 验证，确定 hpa1 Xoo、hpaXm 基因均成功转化至HAB －5菌株中；经 SDS －PAGE 电泳，在分子量大小约39、41 ku 处可见明显条带，表明 hpa1 Xoo、hpaXm基因分别编码的融合蛋白 GST －harpinXoo、GST －harpinXm 在突变体菌株中得到表达；与出发菌株 HAB －5菌株相比，转化后的突变体在菌落形态、拮抗活性上均发生了改变，且突变体总蛋白可在烟草叶片上激发过敏性反应，而 HAB －5菌株总蛋白不能激发过敏性反应；突变体菌株对番茄种子的促生作用显著提高，且转入 hpaXm基因的菌株效果更佳，使胚芽、胚根的生长分别提高100．77％、69．14％。可见，harpin 能够在短短芽孢杆菌 HAB －5菌株中得到表达，且转化后的突变体表现出良好的促生效果。