胡杨休眠茎尖的包埋玻璃化法冷冻保存研究

[目的]建立适合胡杨休眠茎尖的冷冻保存方法,对珍稀濒危植物胡杨种质资源进行保存.[方法]取深冬胡杨休眠茎尖,无菌处理后,包埋在3％褐藻酸钙胶球中,对包埋后的胶球进行蔗糖预培养,预培养后的胶球再用玻璃化保护液进行处理.研究预培养过程中蔗糖浓度、预培养时间及不同玻璃化保护液和处理时间对胡杨休眠茎尖存活率的影响.[结果]含有休眠茎尖的褐藻酸钙胶球在0.8 mol/L蔗糖溶液中预培养24 h,经玻璃化保护液[40％甘油+ 45％ (0.4 mol/L)蔗糖+10％聚乙二醇(4 000) +5％二甲基亚砜],于室温下处理30 min后再弭进行冷冻保存,可以获得较好的存活率.[结论]在优化的条件下,胡杨休眠茎尖存活率可高达77％,对保存后再生的幼芽进行遗传稳定性检测,未发现变异.采用液氮冷冻保存胡杨休眠茎尖是可行的.