新型前处理技术结合超高效液相色谱法测定吸烟者尿液中的苯并[a]芘及3-羟基苯并[a]芘的含量

以索氏提取装置为基础,结合基质固相分散萃取和柱层析的实践,自行设计并制成了集萃取、净化与浓缩于一体的新型样品前处理装置,用于超高效液相色谱法测定吸烟者尿液中苯并[a]芘(B[a]P)和3-羟基苯并[a]芘(3-OHB[a]P)含量时的样品前处理.采集尿样50 mL,加入乙酸盐缓冲溶液(pH5.0) 0.5g,β-葡糖苷酸-芳基硫酸酯酶0.1 mL,于38℃振荡水解5.0h.从中分取试液20.00 mL,浓缩至近干,并分散于2.0g硅胶中.将此分散体烘干后,按规程移入于上述前处理装置中.用60 mL环己烷-乙醇(98+2)混合液于90℃水浴加热回流提取45 min.继续加热蒸发溶液至近干,用1 mL乙腈溶解残留,并过滤后供超高效液相色谱分析.色谱分析中用ACQUITY UPLCTM BEH C18色谱柱为固定相,以乙腈-水(68+32)混合液为流动相进行洗脱.出峰时间在0～6.5 min时用λex365 nm和λem 450 nm,荧光检测3-OHB[a]P,在6.5～12.0 min时用λex384 nm和λem406 nm,荧光检测B[a]P,两者的质量浓度依次在4.0～200 μg·L-1和10～250 μg·L-1内与相应的峰面积呈线性关系.检出限(3S/N)依次为0.65,3.6μg·L-1.加标回收率分别在86.8％～92.8％和91.2％～95.7％之间,测定值的相对标准偏差(n=7)均小于4.0％.