葡萄籽原花青素提取物对砷诱导人肝细胞HL-7702损伤的保护作用及其机制

目的:研究葡萄籽原花青素提取物(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE)对砷诱导的人肝细胞HL-7702损伤的保护作用及其机制,为砷中毒的防治和GSPE的抗氧化研究提供理论依据.方法:将人肝细胞HL-7702分为对照组、砷染毒组(25 μmol/L)、GSPE干预组(5、10、25、50 mg/L)以及GSPE单独干预组(50 mg/L),分别处理24 h和48 h后,分别测定天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平以及总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)变化.噻唑蓝(3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-yl)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT)法分析细胞生存率,利用实时定量聚合酶链式反应以及Western blot法检测HL-7702细胞中核因子E2相关因子(nuclear factor erythroid-2 related factor 2, Nrf2)、血红素氧合酶1(heme oxygenase 1,HO-1)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)和谷胱甘肽巯基转移酶(glutathione S-transferase,GST)的mRNA以及蛋白表达.结果:MTT实验发现,与对照组比较,高浓度砷(≥25 μmol/L)染毒组细胞存活率显著降低(P<0.05).GSPE干预组(>10 mg/L)细胞中的ALT和AST活力、MDA水平显著低于砷染毒组(P<0.05),SOD活力、GSH含量以及T-AOC水平显著高于砷染毒组(P<0.05),GSPE干预组HL-7702细胞中Nrf2、HO-1、NQO1、GST的mRNA及蛋白表达增高(P<0.05).结论:GSPE对砷诱导的人肝细胞HL-7702氧化损伤具有拮抗作用,且具有一定的剂量效应关系,其机制可能是通过激活Nrf2介导的抗氧化信号通路,提高细胞抗氧化能力,从而改善砷引起的肝损伤.