固相萃取-反相高效液相色谱法测定汤料中的碱性橙Ⅱ

建立一种快速、高效测定汤料中碱性橙Ⅱ的固相萃取-反相高效液相色谱(SPE-RP-HPLC)方法.用酸化甲醇溶液提取样品,上清液加入到HLB固相萃取小柱后,选择甲酸-水溶液淋洗,氨化甲醇洗脱,过0.22μm滤膜后上机检测.采用Waters RP C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)分离,以甲醇-乙酸铵(20mmol/L)水溶液作为流动相,用二极管阵列检测器检测,外标法峰面积定量.结果表明,碱性橙Ⅱ在1.0μg/mL ～ 25.0μg/mL浓度范围内线性良好,相关系数r2为0.9992,检出限为0.04μ g/mL,定量限为0.12μg/mL,加标回收率达到89.2％ ～ 91.5％.该方法具有前处理简单、净化效果好、灵敏度高和检测速度快的优点,适用于汤料中碱性橙Ⅱ的分离和定量检测.