果聚糖蔗糖酶基因的克隆表达及酶学性质分析

Jun XU,Yanzhou ZHANG,Xunhang LI,Zhengbing GUAN,Yujie CAI,Xiangru LIAO

Journal of Food Science and Biotechnology（2019）

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摘要

将来源于解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的果聚糖蔗糖酶(levansucrase)基因进行克隆,并将其在Escherichia coli BL21 (DE3)中表达.对发酵产酶后的菌体进行破壁和离心,粗酶液经镍柱纯化后,进行酶学性质研究.结果表明,重组酶的水解酶活和转移酶活最适温度分别为45℃和40℃,最适pH分别为6.5和6.0.此外,果聚糖蔗糖酶的Km和Vmax分别为150.74mmol/L和21.23 μmol/(mL· min).最后,在pH 6.0、40℃条件下,果聚糖蔗糖酶催化反应12 h后,体系中果聚糖质量分数可达34.05％.

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