高效液相色谱-串联质谱法测定水果中叶酸及其稳定性

建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定水果中叶酸(PteGlu)、四氢叶酸(H4PteGlu)、5-甲基-四氢叶酸(5-CH3-H4PteGlu)的方法,同时研究了不同温度、处理时间、pH对3种叶酸稳定性的影响.以0.1％甲酸乙腈溶液-0.1％甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾正离子模式下,以多反应监测(MRM)模式进行检测.结果 表明,3种叶酸在10～100 ng/mL质量浓度范围内线性关系良好,线性相关系数(R2)均大于0.99,5-甲基-四氢叶酸的检出限为1 ng/mL,叶酸、四氢叶酸的检出限均为2 ng/mL,平均回收率为59.34％～65.67％.不同水果3种叶酸的含量差异较大,叶酸的含量范围在3.11～27.33 μg/100 g之间,四氢叶酸的含量范围在10.65～26.87 μg/100 g之间,5-甲基-四氢叶酸的含量范围在8.33～32.72 μg/100 g之间.pH对3种叶酸稳定性的影响较大,温度和时间影响相对较小,叶酸在pH 7较稳定,四氢叶酸和5-甲基-四氢叶酸在pH 6较稳定.该方法简单、快速,灵敏度高,可为水果中叶酸的检测提供参考依据.