流式细胞术检测食管鳞癌患者外周血循环肿瘤细胞

目的 利用密度梯度离心法和流式细胞术联合检测食管鳞癌患者外周血循环肿瘤细胞(circu-lating tumor cells,CTCs),以建立一种高效简单易行的食管鳞癌CTCs分离和检测方法.方法 选取中国人民解放军总医院第六医学中心胸外科2017年10月—2018年5月收治的20例食管鳞癌患者和5名健康志愿者,抽取外周血7.5 mL,用密度梯度离心法提取外周血中单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PB-MC),然后用流式细胞术的方法对提取的PBMC进行标记,用抗EpCAM、抗CD45以及抗Cytokeratin(CK)单克隆抗体对PBMC进行抗体染色标记,将其中CD45阴性,EpCAM阳性且CK阳性的细胞定义为CTCs.同时将健康志愿者外周血中加入不同数量的食管鳞癌细胞来检测该方法的敏感度.结果 以CTCs≥3/7.5 mL基数定义为CTCs阳性;CTCs<3/7.5 mL基数定义为CTCs阴性.观察组中CTCs检出率达75％,对照组中未检出.用流式细胞术检测食管鳞癌外周血中CTCs的敏感度为10-6.结论 初步建立了一种特异性好,敏感度较高,操作简单易行的食管鳞癌CTCs分离和检测方法.