羧胺三唑通过肿瘤相关巨噬细胞间接抑制肿瘤细胞的迁移

目的：通过体外诱导探索肿瘤相关巨噬细胞（TAM）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对肿瘤细胞增殖和迁移的影响；在此基础上研究羧胺三唑（CAI）是否可以通过影响TAM及其来源的TNF-α间接抑制肿瘤细胞的增殖和迁移。方法建立腹腔巨噬细胞或RAW264.7细胞与Lewis 肺癌细胞（LLC）的共培养体系，研究巨噬细胞对 LLC 细胞增殖和迁移的影响；观察TNF-α或其中和抗体对LLC增殖或迁移的影响；向共培养体系中加入CAI和（或）地塞米松（DEX），观察药物对巨噬细胞诱导的LLC增殖的影响；用CAI和（或）DEX预先处理RAW264.7细胞，然后检测不同药物处理组RAW264.7细胞诱导LLC细胞迁移和TNF-α表达的差异。结果与腹腔巨噬细胞共培养的 LLC细胞比单独培养的LLC细胞的增殖显著增加，在最为明显的一组中，前者比后者的增殖增加（422.5±77.7）%；与 RAW264.7细胞共培养的 LLC 细胞比单独培养的 LLC 细胞迁移增加（98.8±6.2）%。在这两个过程中，TNF-α均发挥重要作用，0.1 ng/ml TNF-α增加LLC细胞增殖的作用显著，0.1μg/ml TNF-α中和抗体即可显著抑制巨噬细胞对LLC细胞的迁移诱导作用；CAI预处理的RAW264.7细胞促进LLC细胞迁移的能力减弱，其中TNF-α表达相比仅用LLC条件培养基诱导的对照组显著降低（CAI预处理组与对照组TNF-α的相对表达量为0.66±0.03 vs.1.00±0.05，P＜0.01）。结论巨噬细胞和TNF-α对LLC细胞的增殖和迁移有显著影响；CAI可以通过下调肿瘤条件诱导的巨噬细胞中的TNF-α水平间接抑制肿瘤细胞的迁移。