IL-32γ活化Akt通路诱导肝星状细胞LX-2表达MMP2

目的 探讨IL-32γ 诱导肝星状细胞LX-2表达基质金属蛋白酶2(MMP2)及其机制.方法 不同浓度(0、10、20μg/L)的IL-32γ 蛋白与LX-2细胞共培养,RT-PCR检测细胞MMP2 mRNA水平;ELISA检测MMP2蛋白水平,Human Phospho-Akt Immunoassay试剂盒检测活化的Akt水平.不同浓度(0、25、50μg/L)的重组人活化Akt蛋白与LX-2细胞共培养后,ELISA检测MMP2蛋白;不同浓度(0、10、20μmol/L)的Akt抑制剂Perifosine与IL-32γ 和LX-2细胞共培养后,ELISA检测MMP2蛋白.3组Akt、MMP2 mRNA及蛋白比较采用单因素方差分析和LSD-t检验.结果 不同浓度的IL-32γ 蛋白与LX-2细胞共培养后,MMP2 mRNA和蛋白水平分别为(0.9±0.4)、(5.5±1.4)、(12.2±2.6)和(53±13)、(234±38)、(523±101)μg/L,呈剂量依赖性升高(LSD-t=5.517,3.952和7.855,4.634;P<0.05).IL-32γ 可诱导LX-2细胞Akt表达,依浓度分别为(86±9)、(287±60)、(650±170)RFUs,呈剂量依赖性升高(LSD-t=5.700,3.489;P<0.05).重组人活化的Akt蛋白可诱导LX-2细胞MMP2表达,依浓度分别为(54±14)、(277±45)、(550±132)μg/L,呈剂量依赖性升高(LSD-t=8.155,3.387;P<0.05).不同浓度的Perifosine可抑制IL-32γ 诱导LX-2细胞的MMP2表达,MMP2蛋白依浓度分别为(553±86)、(233±28)、(89±12)μg/L,呈剂量依赖性降低(LSD-t=6.130,8.083;P<0.05).结论 IL-32γ 可能通过活化Akt通路诱导肝星状LX-2细胞表达MMP2而参与肝纤维化和肝癌的发生、转移.