小鼠颌下腺上皮细胞的体外培养及鉴定

目的 建立小鼠颌下腺上皮细胞的体外培养方法,探究细胞的最佳分离和培养条件,为干燥综合征等唾液腺相关疾病的研究和药物评价提 供体外实验模型.方法 用Ⅳ型胶原酶消化分离小鼠的颌下腺细胞;锥虫蓝染色法测定细胞存活率;差速贴壁法纯化细胞.以含有10 μg/L表皮生长因 子的F-12/DMEM培养液进行培养,光学显微镜观察细胞形态;增殖曲线评估细胞增殖特性;免疫荧光染色法鉴定细胞.结果 经胶原酶消化法所获得的 细胞存活率为97.5％;镜下观察显示细胞为典型的上皮样,呈多边形,铺路石样排列;根据增殖曲线,细胞增殖能力良好,一般能传3代;免疫荧光结 果显示,cytokeratin 8表达阳性,vimentin表达阴性,符合唾液腺细胞的表型特征.结论 本实验成功建立了小鼠颌下腺上皮细胞的原代和传代培养 方法,方法简便易行,这为进一步实验研究提供了技术基础.