circRNA_001131通过结合miR-25-3p抑制心肌成纤维细胞中纤维化相关基因的表达

目的:研究环形RNA(circRNA)_001131对大鼠心肌成纤维细胞(CFs)纤维化表型的影响及分子机制.方法:采用Masson三色染色法对腹主动脉缩窄(AAC)手术诱导的心肌重构大鼠心肌进行胶原纤维的染色观察.利用芯片检测AAC手术诱导的大鼠心肌中circRNA表达谱的变化.RT-qPCR检测AAC大鼠心肌及血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)诱导的大鼠CFs中circRNA_001131的表达.利用放线菌素D和RNase R实验检测circRNA_001131的稳定性.利用重组circRNA_001131腺病毒(rAd-circRNA_001131)感染大鼠CFs,检测CFs中纤维化相关基因Ⅰ型胶原α1链(Col1a1)、Ⅲ型胶原α1链(Col3a1)和肌动蛋白α2(Acta2)的mRNA和蛋白表达.双萤光素酶报告基因实验验证circRNA_001131与miR-25-3p的结合作用.结果:RT-qPCR结果证实,circRNA_001131在AAC手术诱导的大鼠心肌和Ang-Ⅱ处理的大鼠CFs中表达增强.放线菌素D和RNase R实验结果显示,circRNA_001131与其宿主基因——第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(Pten)mRNA相比,降解水平明显降低.过表达circRNA_001131可显著抑制大鼠CFs中纤维化相关基因Col1a1和Col3a1的表达.双萤光素酶报告基因实验证实circRNA_001131与miR-25-3p间存在结合作用,miR-25-3p可以减弱circRNA_001131对大鼠CFs中纤维化相关基因表达的抑制作用.结论:circRNA_001131在心肌纤维化中表达增强,并通过结合miR-25-3p发挥抑制心肌纤维化的作用.