河南猪流感病毒H3N2分离株NP基因表达及抗原性分析
Chinese Journal of Public Health（2015）
摘要
目的表达猪流感病毒（swine influenza virus,SIV）H3N2分离株NP基因,获得具有良好抗原性的NP蛋白。方法 PCR扩增猪流感病毒A/swine/Henan/2/2008（H3N2）NP基因,经EcoR I和Xho I双酶切后插入p ET32a（+）载体,并转化大肠杆菌Rosset（DE3）菌株;PCR、EcoR I和Xho I双酶切及DNA测序鉴定重组质粒p ET32a-NP;IPTG诱导,表达、纯化NP并免疫家兔制备免疫血清,SDS-PAGE、WB测其反应原性;同时构建pc DNA3.1-NP并转染293T细胞,免疫荧光检测其免疫源性。结果成功构建重组载体p ET32a-NP和pc DNA3.1-NP,SDS-PAGE和WB显示融合蛋白约80 k D,能与感染SIV的猪血清特异性反应,并且纯化蛋白制备的多克隆血清能识别293T细胞中表达的NP蛋白。结论正确表达SIV H3N2 NP蛋白,并有良好的抗原性,为研究猪流感病毒NP诊断抗原和亚单位疫苗奠定基础。
更多AI 理解论文
溯源树
样例
生成溯源树，研究论文发展脉络
Chat Paper
正在生成论文摘要