狂犬病病毒糖蛋白跨膜区和膜内区的替换对其生物学特性的影响

为研究表达狂犬病病毒(RV)糖蛋白(G)重组新城疫病毒(rL-RVG)中RV G跨膜区(TM)及膜内区(CT)对RVG蛋白表达、病毒蚀斑的形成以及免疫原性的影响,本研究采用新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)的TM和CT替换G蛋白的相应部分,构建出表达RV嵌合G蛋白(RVGTC)的重组NDV (rL-RVGTC).激光共聚焦和western blot检测结果显示,rL-RVG和rL-RVGTC在BHK-21细胞中RVG表达量无显著差异;而且rL-RVG与rL-RVGTC在鸡胚中的病毒增殖滴度也无显著差异.但间接免疫荧光结果表明,rL-RVGTC在BHK-21细胞中丧失RV或rL-RVG形成病毒蚀斑的能力.并且以5×107半数鸡胚感染量(EID50)的rL-RVG和rL-RVGTC分别免疫小鼠后,rL-RVGTC诱导产生的RV中和抗体的滴度显著低于rL-RVG诱导的滴度.本实验结果显示TM和CT对RV G的病毒蚀斑形成及其免疫原性是必不可少的.