过表达Hsa-miR-23b-3p抑制CasKi人宫颈癌细胞的增殖、侵袭和迁移及上皮间质转化

Xi bao yu fen zi mian yi xue za zhi = Chinese journal of cellular and molecular immunology(2020)

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摘要
目的 探讨miR-23b-3p对CasKi人宫颈癌细胞增殖、侵袭与迁移的影响.方法 体外培养CasKi人宫颈癌细胞和HaCaT正常上皮细胞,采用实时定量PCR检测两种细胞miR-23b-3p的表达水平.采用脂质体转染miR-23b-3p模拟物(miR-23b-3p mimic)的方法建立外源性miR-23b-3p过表达的CasKi细胞,阴性对照组中转染无关序列;CCK-8法检测过表达miR-23b-3p后CasKi细胞的增殖,TranswellTM侵袭实验检测细胞的侵袭能力、TranswellTM迁移实验和划痕愈合实验检测CasKi细胞的迁移能力;Western blot法检测神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、Snail、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的蛋白表达.结果 与HaCaT细胞相比,CasKi细胞miR-23b-3p表达水平较低.与阴性对照组相比,转染miR-23b-3pmimic的CasKi细胞miR-23b-3p水平明显上调;miR-23b-3p表达上调后,细胞增殖能力减弱,PCNA及cyclinD1表达减少;同时,过表达miR-23b-3p后,CasKi细胞的侵袭及迁移能力均明显受抑制;同时增加E-cadherin蛋白的表达,而抑制vimentin、Snail和N-cadherin蛋白的表达.结论 过表达miR-23b-3p抑制CasKi宫颈癌细胞的增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化(EMT).
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