西达本胺联合苦参碱对皮肤T细胞淋巴瘤细胞系增殖、凋亡的影响及可能的凋亡机制

目的 研究西达本胺联合苦参碱对皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)细胞系的增殖抑制和凋亡诱导作用,探讨其凋亡机制.方法 采用0.4 μmol/L西达本胺、0.6 g/L苦参碱单药或联合分别作用HH、Hut78细胞24、48、72 h后,MTS法检测HH、Hut78细胞增殖率.二甲基亚砜(DMSO)处理HH、Hut78细胞作为对照组.西达本胺、苦参碱单药或联合作用两细胞系48 h后,流式细胞仪检测HH和Hut78细胞凋亡率,Western免疫印迹法检测各组细胞凋亡相关蛋白的表达.统计分析采用重复测量、单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验.结果 与对照组相比,西达本胺、苦参碱单药或联合均能一定程度抑制HH、Hut78细胞增殖(F=15.88、558.26,P＜0.05、＜0.001).48 h时,Hut78细胞系苦参碱组(20.98％±1.53％)、西达本胺组(22.44％±7.74％)和联合组细胞凋亡率(44.53％±1.85％)均显著高于对照组(8.42％±4.23％;LSD-t=4.76、5.31、13.69,均P＜ 0.05),且联合组显著高于苦参碱组和西达本胺组(LSD-t=8.93、8.37,均P＜0.01).HH细胞系苦参碱组(13.98％±3.86％)、西达本胺组细胞凋亡率(13.61％±1.62％)与对照组(11.44％±1.43％)相比差异无统计学意义(均P＞0.05),但联合组(20.94％±0.64％)显著高于对照组、苦参碱组和西达本胺组(LSD-t=7.37、5.40、5.69,均P＜ 0.05).HH细胞系中,联合组caspase-3剪切体蛋白表达显著高于对照组、苦参碱组和西达本胺组(均P＜ 0.05),而E-cadherin、p65、p-Bad及Bcl-2蛋白表达显著低于其他3组(均P＜0.05).Hut78细胞系中,苦参碱组、西达本胺组和联合组E-cadherin、p65、p-Bad、Bcl-2蛋白表达均显著低于对照组(均P＜ 0.05),仅西达本胺组和联合组caspase-3剪切体蛋白表达显著高于对照组(均P＜0.05).HH及Hut78细胞4组Bad蛋白表达差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 西达本胺联合苦参碱可抑制HH、Hut78细胞增殖,诱导其凋亡,其机制可能与调控细胞凋亡相关蛋白E-cadherin、p65、p-Bad、Bcl-2及caspase-3剪切体蛋白表达有关.