褪黑激素对氯胺酮诱导胎鼠海马神经元凋亡的影响

目的 探讨褪黑激素对氯胺酮诱导胎鼠海马神经元凋亡的影响.方法 原代培养孕16～18 d SD大鼠胎鼠海马神经元5d,采用随机数字表法,将神经元随机分为5组(n=6):对照组(C组)、氯胺酮组(K组)和不同浓度褪黑激素组(M1～3组,浓度分别为1.0、2.5和5.0 mmol/L),K组加入氯胺酮(终浓度为1000 μmol/L)孵育3h,M1～3组给予氯胺酮前60 min时加入褪黑激素,使各组褪黑激素浓度分别为1.0、2.5、5.0 mmol/L,C组加入等量生理盐水.采用MTT法检测发育期神经元活性,流式细胞仪检测线粒体膜电位(Ψm),Western blot法测定cAMP反应元件结合蛋白[p-CREB(Ser133)]、Bcl-2、Bax、细胞色素c表达.结果 与C组相比,K组神经元活性降低,神经元线粒体膜电位(Ψm)明显降低(P＜0.05),p-CREB(Ser133)和Bcl-2表达下调,Bax和细胞色素c表达上调(P＜0.05)；与K组相比,M2和M3组神经元Ψm升高,M1～3组神经元活性增加,Bcl-2表达上调,Bax和细胞色素c表达下调(P＜0.05),p-CREB(Ser133)表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 褪黑激素通过调节Bcl-2和Bax表达,稳定Ψm,抑制线粒体内细胞色素c释放,阻止凋亡复合体的形成,进而抑制氯胺酮诱导胎鼠海马神经元凋亡.