Cks1表达对人食管癌EC9706细胞辐射敏感性的影响

目的 通过多种转染方法改变人食管癌细胞EC9706中Cks1的表达,探究Cks1的表达对细胞辐射敏感性的影响.方法 通过3种转染方式构建人食管癌EC9706细胞模型,分别为Cks1正义转染组(以亲本组和空载组为对照)、Cks1 RNAi组(以亲本组和阴性对照组为对照)和Rescue组(转染了抗Cks1 RNAi的突变载体,以亲本组和RNAi组作为对照).Western blot法检测转染后EC9706细胞中Cks1蛋白的表达量;6 Gy γ射线照射转染后的EC9706细胞,MTT法和克隆形成实验检测EC9706辐射敏感性的变化.结果 Western blot检测结果表明,转染成功改变了Cks1的表达量.正义转染实验中,相对于亲本组和空载组,Cks1正义转染组Cks1表达量提高(t=17.10、14.95,P＜0.05);RNA干扰实验中,相对于亲本组和阴性对照组,RNAi组表达量降低(=3.85、6.37,P＜0.05);Rescue实验中,Rescue组较RNAi组表达量明显回升(t=7.72,P＜0.05),接近亲本组的表达水平(P＞0.05).MTT实验结果表明,6Gyγ射线照射后,Cks1正义转染组细胞的增殖能力显著高于亲本组(t=3.42、4.74、4.02,P＜0.05)和空载组(t=3.39、4.44、4.37,P＜0.05).RNAi组细胞的增殖能力显著低于亲本组(f=7.33、8.27,P＜0.05)和阴性对照组(t=6.98、7.34,P＜0.05).Rescue组细胞的增殖能力显著高于RNAi组(t=11.61、9.99,P＜0.05),与亲本组相近(P＞0.05).克隆形成实验结果表明,Cks1正义转染组细胞克隆形成能力显著高于亲本组(t=13.95,P ＜0.05)和空载组(t=14.72,P＜0.05),RNAi组细胞的克隆形成能力显著低于亲本组(t=20.14,P＜0.05)和阴性对照组(t=10.01,P＜0.05),Rescue组细胞的克隆形成能力显著高于RNAi组(t=10.57,P ＜0.05),与亲本组相近(P＞0.05).结论 Cks1的表达与食管癌细胞辐射敏感性密切相关,Cks1表达量越高,食管癌细胞辐射敏感性越低.