特发性不育患者外周血和睾丸组织中无精子因子基因表达的比较研究

目的 探讨男性特发性不育患者外周血和睾丸组织中无精子因子(AZF)基因表达的临床意义.方法 特发性不育患者62例,其中严重少精子症29例.无精子症33例.抽取患者外周血样本检测,8对引物为sY84和sY86(AZFa区).sY127和sY134(AZFb区),sY254和sY255(AZFc区)及内对照SRY(sY14)和ZFY.PCR检测包括MixA:SRY(sY14)-ZFY-sY84-sY134-sY255和MixB:SRY(sY14)-ZFY-sY86-sY127-sY254;穿刺获得患者睾丸标本,Trizol方法提取总RNA,反转录为cDNA.PCR检测包括SRY(sY14)-DFFRY-RBM-DAZ-β-actin.结果 外周血PCR结果显示:62例患者中AZF基因微缺失12例(19.4%),其中无精子症组9例,严重少精子症组3例.睾丸组织RT-PCR结果显示:62例均可见SRY阳性表达;RBM mRNA无表达2例,RBM和DAZ mRNA无表达1例,DAZ mRNA无表达12例,其中3例外周血细胞内DAZ基因正常.结论 特发性不育患者睾丸组织存在AZF基因表达缺失,睾丸组织RT-PCR检测有助于确定患者病因,结合外周血PCR检测有助于指导睾丸精子穿刺一胞浆内单精子注射治疗.