微小分子核糖核酸-449a调控CXC族趋化因子5抑制肝癌细胞迁移和侵袭

目的 探讨微小分子核糖核酸(miRNA,miR)-449a在肝癌中的表达和对肝癌细胞迁移、侵袭的影响及其调控机制.方法 收集18例肝癌组织及癌旁组织,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测组织和4种人肝癌细胞株、人正常肝细胞中miR-449a表达;将人肝癌细胞株转染miR-449a类似物(mimic)和阴性对照(NC)质粒,RT-PCR检测转染后miR-449a表达量;Transwell小室实验检测转染后两组细胞的侵袭和迁移细胞数,Western blot检测细胞中CXC族趋化因子5(CXCL5)蛋白表达.结果 与癌旁组织比较,肝癌组织中miR-449a表达量显著降低(0.957±0.165比0.462±0.221,t =4.137,P=0.021),与正常肝细胞比较,4种人肝癌细胞株中miR-449a表达量显著降低,差异均有统计学意义(P =0.009、0.008、0.005、0.020);选择miR-449a表达量中间的两种人肝癌细胞株BEL-7402和HepG2,采用miR-449a mimic转染后miR-449a表达量显著升高(BEL-7402:6.873±1.293、HepG2:7.246±1.320、NC:1.000,P=0.012、0.017),且肝癌细胞的迁移(BEL-7402比NC:21.57±13.32比79.84±11.68,HepG2比NC:45.32±12.65比92.21±15.43,t=24.331、21.109,P=0.011、0.019)和侵袭细胞数显著降低(BEL-7402比NC:10.25±3.21比26.63±6.48,HepG2比NC:23.44±10.08比65.65±12.26,t=11.039、12.224),与NC比较差异有统计学意义(P =0.010、0.008);过表达miR-449a后两种肝癌细胞中CXCL5蛋白表达显著降低(BEL-7402比NC:0.367±0.083比0.965±0.110,HepG2比NC:0.163±0.043比0.949±0.141,t=20.176、25.158),与NC比较差异有统计学意义(P=0.021、0.016).结论 miR-449a在肝癌中低表达,可能作为抑癌基因通过靶向调控CXCL5影响肝癌细胞迁移和侵袭.