粪便标本中携带mcr-1基因革兰阴性杆菌的分离与分子特征分析

目的 了解住院患者及体检人群肠道中携带mcr-1基因的革兰阴性杆菌的定植情况,阐明mcr-1基因流行的分子特性.方法 收集广州医科大学附属第一医院临床粪便标本1263份和广州金域体检中心粪便标本750份,在含黏菌素的麦康凯培养基上分离耐药菌株;PCR法检测耐药菌株中的mcr-1基因,多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)及肠杆菌基因间重复共有序列PCR(enterobacterial repetitive intergenic consensus-PCR,ERIC-PCR)对菌株进行同源性分析;用质粒接合试验验证mcr-1基因的可转移性,用基于PCR的复制子分型法对质粒进行分型,用PCR法检测12种毒力基因.结果 1263份住院患者标本中共筛选到92株耐药菌(7.3％,92/1263),其中2株携带mcr-1(1株同时携带碳青霉烯酶基因blaNDM-5);750份体检标本中筛选到36株耐药菌(4.8％,36/750),其中1株携带mcr-1基因.MLST分析显示3株mcr-1阳性大肠埃希菌(MIC均为8μg/ml)为不同的序列型(sequence type,ST),ERIC-PCR显示为3种不同的克隆株.3株携带mcr-1基因的菌株均接合成功.mcr-1基因阳性菌株携带6种质粒型(IncFⅡ、IncX2、IncHI2、IncFIB、IncX4和IncX1)及毒力基因fimH、iutA、fyuA.结论 耐黏菌素菌株及mcr-1基因在住院患者及体检人群中均存在一定的流行率,为临床抗感染治疗带来潜在风险.