姜黄素对人黑素瘤细胞株A375和C8161细胞AKT/mTOR信号通路的影响

目的 探讨姜黄素对恶性黑素瘤体外抗癌作用的分子机制.方法 体外培养的人黑素瘤细胞株A375和C8161分为实验组和对照组.实验组经不同浓度姜黄素处理一定时间,对照组采用二甲基亚砜处理.采用噻唑蓝法检测姜黄素对A375和C8161细胞增殖的影响,体外侵袭实验检测姜黄素对A375和C8161细胞侵袭的影响,流式细胞仪检测姜黄素对A375和C8161细胞周期的影响,Western印迹检测姜黄素对A375和C8161细胞AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达的影响.结果 噻唑蓝法显示,姜黄素分别在5～ 15 mg/L和5 ～ 10 mg/L浓度时,对A375和C8161细胞抑制作用呈量效关系;在0～48h呈时效关系,与对照组相比差异有统计学意义(P＜ 0.001).其24 h的IC50分别为10 mg/L和5 mg/L.体外侵袭试验显示,10 mg/L和5 mg/L姜黄素分别作用于A375和C8161细胞72 h,可明显抑制细胞侵袭(P＜ 0.001).流式细胞仪检测显示,10 mg/L和5 mg/L姜黄素分别作用于A375和C8161细胞24 h,细胞周期阻滞于G2/M期;A375细胞G2/M期比例为35.00％±3.54％,与对照组120.80％±7.46％相比,差异有统计学意义(P＜ 0.001);C8161细胞G2/M期比例为19.33％±4.04％,与对照组85.00％±9.53％相比,差异有统计学意义(P＜ 0.001).Western印迹检测显示,分别经10 mg/L和5 mg/L姜黄素作用于后,A375和C8161细胞AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达水平下降.结论 姜黄素抑制人黑素瘤细胞株A375和C8161增殖及侵袭机制可能与其诱导细胞周期阻滞及抑制AKT/mTOR信号通路活化有关.