滤膜吸附洗脱法富集模拟水样中甲型肝炎病毒的研究

目的 优化滤膜吸附洗脱法,富集检测模拟水样中的甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV).方法 制备含有HAV的模拟水样,经阴、阳离子两种滤膜吸附之后分别采用摇床、涡流、超声及直接裂解法进行病毒的富集和洗脱,通过Taqman实时荧光定量PCR检测洗脱液中的HAV核酸,并对实验数据进行统计分析.结果 当模拟水样中含有的病毒总量为300 TCID50时,阴、阳离子滤膜富集HAV的效果未发现显著差异(P=0.825＞0.05),但是当模拟水样中的病毒含量提高至1500TCID50和7500 TCID50时,阴离子滤膜富集后的病毒回收率高于阳离子滤膜(P＜0.01).另外,本研究还发现采用直接裂解的方式进行洗脱后,病毒的回收率达到(68.17±16.79)％,显著高于摇床、涡流和超声等方式(P＜0.0001).结论 无论采用阴离子或阳离子滤膜吸附,之后的洗脱过程对HAV的富集有至关重要的影响,通过直接裂解的方式洗脱病毒能够达到较好的回收效果.