DNA甲基化在小鼠脓毒症相关性脑病中的作用

目的 评价DNA甲基化在小鼠脓毒症相关性脑病中的作用.方法 清洁级健康雄性C57BL/6小鼠144只,6～8周龄,体重20～25 g,采用随机数字表法分为4组(n=36):假手术组(Sham组)、脓毒症组(Sepsis组)、假手术+SAM组(Sham+SAM组)和脓毒症+SAM组(Sepsis+ SAM组).采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备小鼠脓毒症相关性脑病模型.Sham+SAM组和Sepsis+SAM组于术前1h及术后12 h腹腔注射DNA甲基化的甲基供体S-腺苷甲硫氨酸(SAM) 100 mg/kg,Sham组和Sepsis组腹腔注射等量生理盐水.于CLP后1、3和7d时通过Y-迷宫和条件恐惧实验检测小鼠认知功能;于CLP后1、3和7d时处死小鼠取海马组织,采用比色法测定全基因组DNA甲基化水平,采用实时荧光定量PCR法检测DNA甲基化转移酶(DNMTl、DNMT3a和DNMT3b)、TET(TET1、TET2和TET3)和TDG的mRNA表达水平.结果 与Sham组比较,Sepsis组新异臂停留时间缩短,僵直时间百分比和各臂穿梭次数总和减少,CLP后1、3和7d时小鼠海马组织全基因组甲基化水平降低,DNMT1、DNMT3a、TET1、TET2、TET3和TDG mRNA表达上调,DNMT3b mRNA表达下调(P＜0.05);与Sepsis组比较,Sepsis+SAM组新异臂停留时间延长,僵直时间百分比和各臂穿梭次数总和明显增加,各时点DNMT1、DNMT3a、TET1、TET2、TET3和TDG的mRNA表达下调,DNMT3bmRNA表达上调(P＜0.05).结论 海马DNA甲基化参与了小鼠脓毒症相关性脑病发生的过程.