碱性成纤维细胞生长因子对创伤性脑损伤大鼠神经细胞自噬的影响

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对创伤性脑损伤(TBI)大鼠神经细胞自噬的影响.方法 将120只健康成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、TBI+载体容量组和TBI+ bFGF治疗组,每组40只.PinPointTM精密皮质撞击器制作大鼠TBI模型,假手术组暴露硬脑膜而不撞击.TBI+ bFGF组于伤前1h鼻腔内给予250 μg/kg的人重组bFGF,而假手术组和TBI+载体容量组在伤前1h鼻腔内给予等量生理盐水.伤后6h用碘化丙啶(PI)染色观察坏死细胞情况.伤后24 h采用改良神经功能缺损评分(mNSS)评价bFGF对大鼠伤后神经功能的影响.伤后48 h采用于湿法测脑组织含水量;采用Westem blot法检测Beclin-1、P62蛋白和微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ/Ⅰ蛋白比值的水平;脑组织切片积分法计算脑组织损伤体积;免疫荧光染色测定神经元特异性核蛋白(NeuN)阳性细胞;TUNEL法观察细胞凋亡情况.结果 与假手术组[(4.0±1.2)％]比较,TBI+载体容量组[(54.3±10.1)％]和TBI+ bFGF组[(34.5±10.5)％]的坏死细胞数明显增加(P＜0.05),但TBI+ bFGF组坏死细胞数少于TBI+载体容量组(P＜0.05).与假手术组[(0.3±0.5)分]比较,TBI+载体容量组[(5.8±0.8)分]和TBI+ bFGF组[(4.7±1.1)分]的mNSS明显升高(P＜0.05),但TBI+ bFGF组mNSS低于TBI+载体容量组(P＜0.05).与假手术组[(76.7±0.7)％]比较,TBI+载体容量组[(79.2±0.5)％]和TBI+ bFGF组[(78.4±1.0)％]脑组织含水量有明显增加(P＜0.05),但TBI bFGF组脑组织含水量明显少于TBI+载体容量组(P＜0.05).与假手术组比较,TBI+载体容量组和TBI bFGF组Beclin-1蛋白、LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白比值水平均明显升高(P＜0.05),P62蛋白明显下降(P＜0.05),脑组织损伤体积明显增加(P＜0.05),NeuN阳性细胞数明显增加(P＜0.05),凋亡细胞数明显增加(P＜0.05);与TBI+载体容量组比较,TBI+ bFGF组Beclin-1蛋白和LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白比值水平的上调被明显抑制(P＜0.05),P62蛋白的下调被明显抑制(P＜0.05),脑组织损伤体积明显减少(P＜0.05),NeuN阳性细胞数和凋亡细胞数明显减少(P＜0.05).结论 bFGF能明显抑制TBI大鼠过度的自噬反应,减轻脑水肿,减少细胞凋亡和坏死,并改善神经功能.