微小RNA-26a通过靶向调控E2F7表达影响乳腺癌细胞增殖与迁移

目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-26a通过靶向调控核转录因子(E2F7)表达影响乳腺癌细胞增殖与迁移.方法 实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法及Western blot分别检测miR-26a、E2F7在乳腺癌细胞BT549、MDA-MB-231、MDA-MB-435、MCF-7及人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)中的表达.脂质体LipofectamineTM 3000将miR-26a mimics和miR-26a NC转入乳腺癌细胞中,并检测miR-26a表达、细胞活力、细胞凋亡率、细胞迁移能力、E2F7蛋白及mRNA表达,同时进行荧光素酶报告基因分析.结果 miR-26a在BT549(0.40±0.04)、MDA-MB-231 (0.35±0.02)、MDA-MB-435(0.42±0.03)、MCF-7(0.55±0.05)乳腺癌细胞中的表达量显著低于MCF-10A细胞(1.46±0.14) (P＜ 0.01).E2F7蛋白在BT549(1.25±0.12)、MDA-MB-231(3.10±0.31)、MDA-MB-435(2.18 ±0.21)、MCF-7 (0.36±0.02)乳腺癌细胞中的表达量显著高于MCF-10A细胞(0.15±0.01) (P ＜0.01).miR-26a mimics组中miR-26a表达量(1.84 ±0.18)高于miR-26a NC组(0.36±0.03) (P ＜0.01);miR-26a mimics组细胞活力(0.383±0.036)低于miR-26a NC组(0.589±0.060) (P ＜0.01);miR-26a mimics组细胞早期凋亡率[(16.51±1.65)％]和晚期凋亡率[(23.47±2.35)％]均高于miR-26a NC组[(2.58±0.26)％、(3.20 ±0.32)％] (P＜0.01).miR-26a mimics组细胞迁移能力(42.36±4.23)低于miR-26a NC组(189.53±15.64) (P＜0.01).miR-26a mimics组中E2F7蛋白及mRNA表达量均较miR-26a NC组下调(P＜0.01),且荧光素酶报告基因结果证实E2F7是miR-26a下游靶蛋白.结论 miR-26a能够通过负性调控E2F7表达抑制MDA-MB-231细胞增殖与迁移.