CD19 CAR基因转染的Nalm-6细胞免疫表型特征分析

目的 探讨CAR-T细胞制备过程中,可能出现的CD19 CAR转染入白血病细胞的免疫表型特征.方法 倒置显微镜观察Nalm-6细胞CD19 CAR转染后细胞形态变化;流式细胞仪检测CD19 CAR的转染率和CD19 CAR Nalm-6细胞的免疫表型;化学发光法检测培养体系的细胞因子分泌.结果 CD19 CAR Nalm-6转染率为(46.50±3.78)％,CD19 CAR KG1a转染率为(15.70±1.22)％;CD19 CAR Nalm-6细胞较Nalm-6细胞增殖迅速(第0天、第4天、第7天、第12天的P值分别为:P0=6.339、P4=3.447、P7=0.012、P12=0.009);CD19 CAR Nalm-6细胞培养过程中出现细胞聚集、互相黏连现象,并逐渐聚集成团;转染率为(46.50±3.78)％的CD19 CAR Nalm-6培养体系CD19表达仅为1.19％,培养体系增加Nalm-6细胞比例后混合培养,CD19表达逐渐增高,而CD22表达无变化;用CD19 CAR Nalm-6细胞培养体系的上清液培养Nalm-6细胞,其CD19表达逐渐下降;CD19 CAR Nalm-6细胞IL-10、TNF-α分泌水平高于Nalm-6细胞.结论 通过对CD19 CAR基因被引入白血病细胞中的免疫表型分析,提示我们CD22 CAR-T治疗可以作为CD19 CAR基因转染入白血病细胞的挽救或联合治疗措施.