艰难梭菌临床分离株的毒素检测和MLST分型

目的 初步研究中日友好医院艰难梭菌临床分离株的毒素特征、核糖体分型和多位点序列分型情况,为进一步监测医院内艰难梭菌暴发流行奠定基础.方法 收集2012年至2013年本院疑似艰难梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDI)的321例腹泻患者的标本,采用表型培养法进行菌株分离和鉴定,并对分离菌株进行毒素B的细胞毒试验,分析菌株的毒素基因(tcdA、tcdB、cdtA、cdtB),采用核糖体分型(ribotyping, RT)和多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)分析菌株间的同源性;收集患者临床信息,分析不同患者人群的CDI发生率.结果 共从46名腹泻患者中分离到48株艰难梭菌菌株,其中3株菌株分离自同一患者;CDI发生率为14.3%(46/321),其中门诊患者为12.8%(5/39)、住院患者为14.5%(41/282);所有菌株的毒素B细胞毒试验均为阳性,其中ST1型较其他ST型菌株毒素作用更强;毒素基因tcdA(-)/tcdB(+)型为20.8%(10/48),主要是ST37和ST81;所有菌株的RT和MLST结果一致,均为相同的9个型别,其中以ST1/RT027为主,占27.1%(13/48),这些ST1/RT027菌株毒素基因检测均为tcdA(+)/tcdB(+)、二元毒素基因检测均为cdtA(+)/cdtB(+),其中中医呼吸病区占84.6%(11/13),提示该病区存在ST1/RT027型菌株的小范围暴发流行的可能.结论 CDI在我院主要以医院感染为主,分离株主要为毒素基因tcdA(+)/tcdB(+)的菌株,监测ST1/RT027高产毒性流行株引发的暴发流行尤为重要.