钠-钾ATP酶介导间充质干细胞修复大鼠急性肺损伤

目的 探讨间充质干细胞(MSCs)旁分泌作用修复急性肺损伤(ALI)的机制.方法 实验设阴性组、炎症组、修复组及对照组,每组大鼠分别注射磷酸盐缓冲液(PBS)、脂多糖(LPS)、LPS+MSCs和MSCs,72h后测定肺湿/干比及制作苏木素-伊红(HE)病理切片.体外共培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AT-Ⅱ)及MSCs,设置阴性组、炎症组、修复组及对照组,共培养72h后提取大鼠AT-Ⅱ蛋白及mRNA,Western blot及定量聚合酶链反应方法观察Na-K-ATPaseα1亚基在蛋白及基因水平的改变以及测定AT-Ⅱ的Na-K-ATPase活性.结果 LPS明显造成大鼠ALI,鼠尾静脉注入MSCs可明显缓解炎症损伤;阴性组、炎症组、修复组及对照组肺湿干比分别为:4.33±0.24、5.21±0.21、4.34±0.19和4.44±0.14,MSCs可明显降低肺湿/干比(P=0.000).体外实验证实MSCs可明显提高AT-Ⅱ的Na-K-ATPase活性.阴性组、炎症组、修复组及对照组Na-K-ATPase的活性分别为0.54±0.01、0.68±0.02、0.75±0.01和0.62±0.00,炎症环境可提高Na-K-ATPase活性,P=0.000;MSCs明显提高Na-K-ATPase活性,P=0.000.4组α1亚基蛋白表达分别为0.737±0.039、0.610±0.022、0.780±0.029 和0.838±0.022,MSCs明显提高Na-K-ATPaseα1亚基的蛋白表达,P=0.000.MSCs同时促进α1基因的表达,4组mRNA表达分别为1.000±0.000、0.787±0.044、3.960±0.091及4.466±0.071,P=0.000.结论 MSCs不仅提高AT-Ⅱ的Na-K-ATPaseα1亚基在蛋白和基因的表达,同时提高Na-K-ATPase活性,从而缓解ALI.