液相色谱串联质谱法测定全血磷脂酰乙醇

目的 建立一种基于液相色谱串联质谱技术(LC-MS/MS)测定全血磷脂酰乙醇(PEth)的方法,用以客观、量化反映饮酒者酒精摄入水平.方法 全血样品中加入磷脂酰丙醇(16:0/16:0)作为内标,用异丙醇溶液沉淀蛋白,震荡、离心、提取上清、氮气吹干,复溶,液相色谱分离后进入串联质谱分析.考察方法的线性、检测限、定量限、回收率和精密度.收集40名有一年以上稳定日常饮酒习惯的志愿者全血样本,测定PEth,分析其与自述酒精摄入量的相关性;分析轻度、中度和重度饮酒者全血PEth水平的差异.结果 本方法线性相关系数大于0.9992,检测限和定量限分别低于0.74 μg/L和2.48 μg/L.测定不同浓度PEth样本的批内和总不精密度分别为0.77%~3.18%和2.30%~6.95%.平均加样回收率为96.88%~102.99%.相关性分析显示,总PEth水平与志愿者自述饮酒量呈正相关(r=0.769,P<0.001).Kruskal-Wallis分析显示不同程度饮酒者的总PEth水平差异有统计学意义(χ2=18.850, P<0.001).结论 建立LC-MS/MS测定全血PEth的方法,该方法简便、精密、可靠,可以有效区分轻、中、重度饮酒者,有望为评价酒精摄入状况以及饮酒与疾病关系提供方法学基础.