HO-1在脂多糖诱导大鼠肺泡巨噬细胞NLRP3炎性小体活化中的作用

目的 评价血红素加氧酶-1(HO-1)在脂多糖(LPS)诱导大鼠肺泡巨噬细胞NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体活化中的作用.方法 将体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞以4x104个/ml密度接种于96孔板.采用随机数字表法分为4组(n=48):对照组(C组)、LPS组(L组)、LPS+HO-1 siRNA组(L+HO-1 siRNA组)和LPS+Con siRNA组(L+Con siRNA组).C组正常培养,L组、L+HO-1 siRNA组和L+Con siRNA组向各培养基中加入10 μg/ml LPS刺激NR8383细胞,L+HO-1 siRNA组LPS刺激前48 h给予HO-1 siRNA转染,L+Con siRNA组LPS刺激前48 h给予Con siRNA转染.LPS刺激后各组均孵育24h收集细胞,测定细胞活力,采用RT-PCR法检测HO-1和NLRP3 mRNA表达,采用Western blot法检测HO-1、NLRP3、凋亡相关微粒蛋白(ASC)及caspase-1表达,采用ELISA法测定上清液IL-1β和IL-18的浓度.结果 与C组比较,L组、L+HO-1siRNA组和L+Con siRNA组细胞活力降低,HO-1和NLRP3及其mRNA、ASC及caspase-1表达上调,IL-1β和IL-18浓度升高(P＜0.05);与L组比较,L+HO-1 siRNA组细胞活力降低,HO-1及其mRNA表达下调,NLRP3及其mRNA、ASC及caspase-1表达上调,IL-1β和IL-18浓度升高(P＜0.05),L+ConsiRNA组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 HO-1参与了LPS诱导大鼠肺泡巨噬细胞NLRP3炎性小体活化的过程.