吉西他滨增强ABT-199对费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病细胞杀伤作用的机制研究

目的 研究吉西他滨联合ABT-199对费城染色体阳性(Ph+)急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞株SUP-B15的增殖抑制及凋亡诱导作用,并探讨其协同作用机制.方法 取对数生长期SUP-B15细胞,分别接受吉西他滨(0.025、0.050μmol/L)、ABT-199(0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0μmol/L)及两药联合处理24 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡情况,JC-1法检测线粒体膜电位的变化,蛋白质印迹法分析线粒体凋亡通路相关蛋白的表达变化.结果 ABT-199作用SUP-B15细胞24 h的半数抑制浓度(IC50)值为(4.13±0.89)μmol/L,吉西他滨(0.025、0.050μmol/L)能增强ABT-199对SUP-B15细胞的增殖抑制作用,其IC50值分别为(2.23±0.73)、(1.15±0.45)μmol/L,差异均有统计学意义(t=28.65,P<0.01;t=35.12,P<0.01).FCM检测细胞凋亡结果显示,与0.025μmol/L吉西他滨单药组[(7.33±1.54)％]相比,0.025μmol/L吉西他滨联合ABT-199(1.0、2.0μmol/L)作用SUP-B15细胞24 h后,凋亡细胞比例分别为(32.42±1.45)％和(44.33±1.86)％,差异具有统计学意义(F=70.78,P<0.001);与0.050μmol/L吉西他滨单药组[(9.60±2.76)％]相比,0.050μmol/L吉西他滨联合ABT-199(1.0、2.0μmol/L)后,凋亡细胞比例增加,分别为(47.63±3.81)％和(58.73±4.33)％,差异有统计学意义(F=79.21,P<0.001).吉西他滨联合ABT-199作用SUP-B15细胞12 h后,去极化细胞的比例高于单药组,差异有统计学意义(P<0.001).吉西他滨联合ABT-199作用SUP-B15细胞12 h后,抗凋亡蛋白bcl-2、bcl-xL、Mcl-1水平下降.结论 吉西他滨可增强ABT-199对Ph+ALL细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用,机制可能与下调抗凋亡相关蛋白相关.