胰岛素样生长因子-1对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝细胞衰老的干预作用

目的 探讨在肝纤维化形成过程中肝细胞衰老的发生情况和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对肝细胞衰老和肝纤维化的作用及可能机制.方法 选取42只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠:18只通过四氯化碳(CCl4)诱导建立肝纤维化大鼠模型,分别于造模第0、6、28天各处死6只,分析CCl4诱导肝纤维化大鼠肝纤维化和肝细胞衰老情况;24只大鼠分入对照组、CCl4组、CCl4+空病毒载体(LV-CTR)组、CCl4+IGF-1慢病毒载体(LV-IGF-1)组,每组6只,于造模第28天处死大鼠,留取肝脏组织,采集下腔静脉血,分析IGF-1过表达对肝纤维化和肝细胞衰老的影响.统计学方法采用方差分析、最小显著差异法和Dunnett T3法.结果 在造模第6天形成脂肪性肝炎,在造模第28天形成早期肝纤维化,提示造模成功.造模第28天,与对照组比较,CCl4组、CCl4+LV-CTR组和CCl4+LV-IGF-1组大鼠肝脏组织的Ishak肝脏炎症坏死评分[分别为0、(14.55±1.94)、(15.43±2.19)和(10.29±1.47)分]和肝纤维化评分[分别为0、(3.51±0.51)、(3.21±0.79)和(1.32±0.40)分]均升高,肝脏组织Masson染色(分别为0.45±0.40、5.62±1.08、6.03±0.65和2.88±1.54)、β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色(分别为1.75±0.80、4.28±1.19、4.92±1.14和3.11士0.79)、p53(分别为2.02±0.81、4.36±1.02、4.72±0.72和3.58±0.70)和早衰蛋白(分别为0.72±0.40、4.52±1.01、4.01±1.25和2.66±0.80)区域面积均增加,血IGF-1水平[分别为(632.00±6.04)、(503.00±40.42)、(508.00±21.94)和(572.40±5.94) ng/L]均降低,ALT水平[分别为(11.20±5.97)、(214.00±73.90)、(245.00±76.06)和(30.00±5.00) U/L]均升高,原代肝细胞中p53(分别为0.58±0.06、1.78±0.18、1.72±0.10和1.23±0.22)、早衰蛋白(分别为0.12±0.02、0.78±0.15、1.32±0.20和0.81±0.16)相对表达量均升高,差异均有统计学意义(F=91.674、90.778、32.982、9.726、10.640、17.029、103.910、30.059、64.707、97.457,P均＜0.05).与CCl4+LV-CTR组比较,CCl4+ LV-IGF-1组大鼠肝脏组织的Ishak肝脏炎症坏死和肝纤维化评分均降低,肝脏组织中Masson、SA-β-Gal、p53、早衰蛋白染色区域面积均缩小,血IGF-1水平升高,ALT水平降低,原代肝细胞中p53和早衰蛋白相对表达量均降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 CCl4诱导肝纤维化过程中,肝细胞衰老增加;过表达IGF-1可能通过调节核内p53/早衰蛋白通路减轻肝损伤,缓解肝细胞衰老和肝纤维化.