黄芪对脊髓损伤小鼠的神经修复作用

目的 观察黄芪对脊髓损伤(SCI)小鼠的神经修复作用.方法 采用自由落体击打法制作SCI小鼠模型,随机将术后小鼠分为对照组和治疗组,对照组不予治疗,术后腹腔注射适量生理盐水,黄芪治疗组术后腹腔注射黄芪注射液,小鼠术后3d麻醉处死,用干湿称重法测定出脊髓含水量,二氢乙锭(HEt)染色测定脊髓活性氧(ROS)的积累,原位缺口末端标记法(TUNEL)试剂盒检测损伤脊髓附近区域的凋亡细胞数量,酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测炎性因子肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素(IL)的表达量,术后7、14、21、28 d分别进行神经功能缺损评分评价损伤小鼠的运动功能,糖水偏嗜实验检测小鼠的抑郁状况,斜面实验评价小鼠的后肢力量,免疫荧光染色检测成熟神经元标志物神经元核性蛋白(NeuN)和脊髓白质标志物髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达量.结果 (1)黄芪治疗组脊髓含水量(67.67±3.34)和对照组(83.33±1.91)比较明显降低,差异有统计学意义(t=4.078,P＜0.01).(2)对照组(2051.67 ±38.05)比较黄芪治疗组ROS荧光强度(1 520.00±71.88)明显降低,差异有统计学意义(t=6.537,P＜0.01).(3)黄芪治疗组细胞凋亡数量[(67.67±3.43)个]和对照组[(79.34±2.53)个]比较数量显著减少,差异有统计学意义(￡=2.740,P＜0.05).(4)黄芪治疗组抑炎因子IL-10表达量(1 084.33±59.97) pg/ml明显高于对照组(747.67±34.65) pg/ml,而治疗组促炎因子TNF-α的表达量(834.50±29.71) ng/ml明显低于对照组(1 033.00±46.86) ng/ml,差异有统计学意义(t=3.58,P＜0.01).(5)脊髓损伤第7、14、21、28天,BMS评分的结果表明,相对于对照组[(1.13±2.50)、(1.75±2.38)、(2.13±2.80)、(3.00±2.63)分],黄芪治疗组评分[(2.50±1.38)、(3.00±1.25)、(3.75±1.63)、(4.50±1.50)分]升高.(6)损伤第21天,斜面放置实验结果显示治疗组斜面度数[(54.75±8.34)°]高于对照组[(41.50±13.25)°].(7)脊髓损伤第21天,糖水偏嗜实验表明黄芪治疗组糖水偏嗜度[(64.67±1.43)％]和对照组[(50.17±2.24)％]比较,差异有统计学意义(t=5.45,P＜0.01).(8)比较对照组[(31.00±1.95)个],治疗组[(51.17±2.40)个]的NeuN阳性细胞数量明显增多,黄芪治疗组[(43.33±1.91)％]的脊髓白质面积明显多于对照组[(29.00±2.21)％],差异有统计学意义(t=4.910,P＜0.01).结论 黄芪对脊髓损伤小鼠存在神经保护作用.