纳秒脉冲消融肝癌对小鼠肝脏区域免疫细胞的影响

目的 探讨纳秒脉冲消融原发性肝癌对小鼠肝脏局部免疫细胞的影响.方法 将40只C57BL-6J小鼠按每组10只随机分为空白对照组、肿瘤组、手术切除组及纳秒脉冲组.对肿瘤组、手术切除组及纳秒脉冲组小鼠肝左叶注入Hepa 1-6细胞建立原位肝癌模型.在建模后第7天对手术切除组行肝左叶切除术,对纳秒脉冲组行纳秒脉冲治疗.治疗后第7天处死所有小鼠,对空白对照组小鼠肝、肿瘤组小鼠肝左叶病灶、纳秒脉冲组脉冲区域及4组肝右叶正常肝组织分别用流式检测仪检测CD3+T、CD4+T、CD8+T、调节性T细胞(Treg)、髓源性抑制细胞(MDSC)、自然杀伤细胞(NK)、B细胞,计算CD4+T与CD8+T的比值.结果 在空白对照组小鼠肝左叶、肿瘤组小鼠肝左叶病灶、纳秒脉冲组脉冲区域中,CD4+T细胞表达空白对照组>纳秒脉冲组>肿瘤组[(25.77±3.76)％比(15.72±2.70)％比(12.68±3.13)％,P<0.05];CD8+T细胞肿瘤组>空白对照组>纳秒脉冲组[(14.01±2.75)％比(13.99±1.41)％比(8.42±2.21)％,P<0.05];CD4+T与CD8+T比值纳秒脉冲组>空白对照组>肿瘤组[(1.90±0.17)比(1.86±0.32)比(0.93±0.21),P<0.05];B细胞纳秒脉冲组>空白对照组>肿瘤组[(47.65±3.77)％比(33.74±3.91)％比(15.94±6.10)％,P<0.05];MDSC细胞肿瘤组>纳秒脉冲组>空白对照组[(18.49±2.74)％比(8.41±3.05)％比(2.15±0.69)％,P<0.05];而CD3+T细胞、NK细胞及Treg细胞在上述3组中差异均无统计学意义(均P>0.05).在4组肝右叶正常肝组织中CD4+T与CD8+T的比值空白对照组>纳秒脉冲组>手术切除组>肿瘤组[(1.86±0.32)比(1.85±0.43)比(1.52±0.16)比(1.36±0.29),P<0.05];B细胞纳秒脉冲组>手术切除组>空白对照组>肿瘤组[(46.85±8.30)％比(34.23±6.17)％比(33.74±3.91)％比(27.64±2.20)％,P<0.05];Treg细胞肿瘤组>手术切除组>纳秒脉冲组>空白对照组[(26.34±6.23)％比(7.01±2.04)％比(3.63±1.59)％比(3.19±1.50)％,P<0.05];MDSC在肿瘤组>手术切除组>纳秒脉冲组>空白对照组[(12.22±2.02)％比(5.00±0.73)％比(2.87±0.96)％比(2.15±0.69)％,P<0.05];而CD3+T、CD4+T、CD8+T、NK细胞在上述四组间差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 纳秒脉冲消融原发性肝癌会激起消融区域及其他肝叶的免疫应答,这有可能是纳秒脉冲引起的机体抗肿瘤免疫效应.