白藜芦醇对脂多糖诱导的肺泡巨噬细胞微小RNA-146a表达的影响

目的 观察白藜芦醇对脂多糖(LPS)诱导肺泡巨噬细胞微小RNA-146a(miR-146a)表达的影响.方法 将体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)按2×106个/孔接种于六孔板,细胞贴壁90 min后,分为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、终质量浓度LPS(1μg/mL)处理组、白藜芦醇(1 μg/mL)预处理30 min+终质量浓度LPS(1μg/mL)处理组、白藜芦醇(1 0μg/mL)预处理30 min+终质量浓度LPS(1μg/mL)处理组.细胞培养6h后,收集细胞和细胞培养上清液,采用实时荧光定量PCR检测细胞中miR-146a的表达变化,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养上清液中TNF-α蛋白的表达变化.结果 与PBS对照组相比,LPS处理组细胞中miR-146a和TNF-α蛋白表达量均明显升高[miR-146a表达倍数(5.92±1.57)倍vs.(1.03±0.58)倍,P＜0.01;TNF-α质量浓度(644.2±36.82) pg/mL vs.(26.15±13.43)pg/mL,P＜0.01].与LPS处理组相比,白藜芦醇预处理组(1μg/mL和10 μg/mL)细胞中miR-146a表达量均明显升高[miR-146a表达倍数(8.67±1.18)倍、(11.17±1.40)倍vs.(5.92±1.57)倍,P＜0.01],TNF-α蛋白质量浓度均显著降低[TNF-α质量浓度(447.7±41.48) pg/mL、(345.0±42.54)pg/mL vs.(644.2±36.82)pg/mL,P＜0.01],且相比于较低质量浓度白藜芦醇组(1μg/mL组),较高质量浓度白藜芦醇组(10μg/mL)更能诱导miR-146a的表达、抑制TNF-α蛋白的分泌(P＜0.01).结论 白藜芦醇可以上调肺泡巨噬细胞内miR-146a的表达水平,推测miR-146a参与了白藜芦醇的抗炎过程.