抗H7N9亚型流感病毒神经氨酸酶单克隆抗体的制备及初步鉴定

Chinese Journal of Clinical Hepatology(2017)

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摘要
目的 制备抗H7N9亚型流感病毒神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)单克隆抗体,并对单抗的活性与功能进行初步鉴定.方法 利用免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合,获取杂交瘤细胞株,用间接ELISA方法筛选获得阳性杂交瘤细胞克隆,单克隆化后制备小鼠腹水单抗,纯化获得抗H7 N9亚型流感病毒NA的鼠源单克隆抗体,对抗体活性及功能进行鉴定.结果 获得特异性抗H7 N9亚型流感病毒N9鼠源单克隆抗体1G8、3C4和4E8,这三株抗体识别抗原表位不同,3C4和4E8能抑制神经氨酸酶活性,IC50分别为1.45 μg/ml和8.65 μg/ml.结论 3株单克隆抗体均特异性识别A/Anhui/1/2013(H7N9)的N9蛋白,有较好的N9结合活性或能抑制N9酶活性功能.本研究对新型H7N9禽流感病毒的诊断和防控提供了一个良好的思路.
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