Yes相关蛋白1调控U87MG胶质瘤细胞株的细胞周期

Chinese journal of experimental surgery(2017)

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摘要
目的 观察Hippo信号通路下游关键因子Yes相关蛋白1(YAP1)对胶质瘤细胞株U87MG细胞增殖周期的影响.方法 使用YAP1特异性小干扰RNA(siRNA)敲低U87MG胶质瘤细胞株YAP的表达,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)鉴定U87MG胶质瘤细胞中YAP1是否已被敲低;采用RT-qPCR方法分别检测干扰24、48 h后YAP1、细胞核增殖抗原(Ki-67)、c-Myc、血管内皮生长因子(VEGF)、细胞周期蛋白(Cyclin) D1、Cyclin E和p73 mRNA的表达变化.结果 3对siRNA寡核苷酸序列对YAP1都有干扰,第1对siRNA寡核苷酸序列对YAP1有较好的干扰效果,干扰效率可达90%以上,P=0.044;以1.0为参照,结果显示,YAP1 (0.213),Ki-67 (0.365),c-Myc (0.618),VEGF(0.534),Cyclin D1 (0.540),Cyclin E (0.494),p73(0.314)在24h出现不同程度下降,在48 h基因的转录水平明显提高;同时可以发现,随着YAP1 (0.810)干扰的恢复,Ki-67(1.051),c-Myc(1.498),VEGF(1.057),Cyclin D1(1.598),Cyelin E(0.897),p73(1.110)的活性明显增高,P =0.007.结论 YAP1调控胶质瘤细胞株U87MG细胞增殖周期,干扰YAP1蛋白后,能阻止细胞增殖于细胞任一周期.
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