利用反向遗传技术进行B型重配流感病毒的构建

目的 反向遗传技术是流感病毒疫苗株构建和基因特性研究的重要方法,本研究旨在构建B型流感病毒反向遗传平台,进而拯救B型流感病毒.方法 研究中利用含有双启动子的pHW2000为载体,对B/Florida/4/2006病毒的8个基因片段构建质粒,获得8个节段的重组质粒后,共转染293T及MDCK混合细胞,收集上清液及细胞碎片,采用接种鸡胚及细胞传代方法,拯救B型流感病毒.结果 研究中发现可以利用该系统拯救B/Florida/4/2006病毒,拯救病毒的血凝滴度为HA 128～256/50μl,电镜下重配病毒颗粒多呈球形.结论 研究结果表明该系统可用于B型流感病毒的拯救,并可进一步利用该系统构建基因突变病毒,用于B型流感病毒的特性分析和疫苗株的构建.