索拉非尼抑制人肝癌裸鼠皮下移植瘤血管生成拟态作用研究

目的：探讨索拉非尼对人肝癌裸鼠皮下移植瘤血管生成拟态的抑制作用及机制。方法构建人肝癌细胞 HepG2裸鼠皮下移植瘤模型，采用配对比较法将其随机分为荷瘤对照组和索拉非尼组（30 mg·kg －1·d －1）。绘制各组肿瘤生长曲线，应用免疫组织化学和过碘酸希夫反应双染法检测肿瘤血管生成拟态，同时利用免疫组织化学、Western blotting 和实时荧光定量 PCR 检测 HIF-1α、VEGFA、VEGFR-1和 MMP-2基因表达。结果与荷瘤对照组相比，索拉非尼组肿瘤体积明显减小[（809．69±208．71）mm3∶（1678．00±313．29）mm3]，差异有统计学意义（t ＝6．103，P ＝0．030）。苏木精-伊红染色显示，对照组肿瘤组织瘤细胞生长旺盛，坏死范围小；索拉非尼治疗组肿瘤组织中有大片坏死区域。与对照组相比，索拉非尼组 DiOC7标记的功能性血管数明显减少[（4．77±0．15）个∶（8．44±0．68）个]，差异有统计学意义（t ＝9．192，P ＝0．013）。索拉非尼组中血管生成拟态数量较荷瘤对照组明显减少[（1．04±0．46）个∶（2．66±0．42）个]，差异有统计学意义（t ＝4．510，P ＝0．041）。与荷瘤对照组比较，索拉非尼组 CD31标记阳性血管数量明显减少[（1．26±0．14）个∶（3．42±0．10）个]，差异具有统计学意义（t ＝21．580，P ＝0．002）。进一步研究发现索拉非尼组 HIF-1α（0．65±0．03∶1．00±0．00）、VEGFA （0．51±0．02∶1．00±0．00）、VEGFR-1（0．45±0．04∶1．00±0．00）和 MMP-2（0．69±0．02∶1．00±0．00）在蛋白水平上表达明显下降（t ＝19．650，P ＝0．003；t ＝40．493，P ＝0．000；t ＝23．429，P ＝0．002；t ＝26．071，P ＝0．002）。同时也发现索拉非尼组 HIF-1α（0．78±0．05∶1．00±0．00）、VEGFA （0．52±0．05∶1．00±0．00）、VEGFR-1（0．45±0．02∶1．00±0．00）和 MMP-2（0．71±0．02∶1．00±0．00）在mRNA水平上表达也明显下降（t ＝6．840，P ＝0．021；t ＝27．710，P ＝0．001；t ＝62．740，P ＝0．000；t ＝23．850，P ＝0．002）。结论索拉非尼抑制实验性肝癌生长和血管生成拟态可能与其抑制 HIF-1α、VEGFA ／VEGFR-1信号通路有关。