Noblp人类同源基因在食管癌组织中的表达及对食管癌细胞凋亡的影响

酵母基因Noblp人类同源基因(NOB1)与多种肿瘤的发生有关.NOB1蛋白在胃癌、肝癌、卵巢癌等多种癌症组织中表达异常上调.本研究中我们旨在探讨NOB1在食管癌中的作用. 一、材料与方法 选取2010年7月至2013年9月在郑州大学附属南阳中心医院确诊切除的食管癌患者食管癌组织及对应的癌旁组织各47例,提取组织蛋白,Western blot检测NOB1水平.人食管癌细胞Eca-109 用含有10%胎牛血清的RPMI 1640细胞培养液培养,用0.25%的胰蛋白酶消化传代.将NOB1小干扰RNA组(NOB1 siRNA)和对照组(siRNA control)用转染试剂Lipofectamine 2000转染至细胞中,同时设置对照组,对照组细胞中只加入转染试剂.培养48h后,Western blot检测细胞中NOB1、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化的细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved Caspase-3)蛋白水平,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡.