HPV E7在人食管鳞癌细胞系EC9706中基因沉默的研究

目的 探讨基因沉默人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)阳性食管鳞癌细胞系EC9706中E7基因后对细胞内基因表达的影响.方法 使用RNAi专用逆转录病毒载体构建可干扰HPV18 E7基因的质粒,转入EC9706细胞系,筛选获得稳定表达干扰片段的细胞株.使用Real-timePCR和Western Blot对胞内相关基因和蛋白进行检测,并比较细胞活力差异.结果 通过质粒构建与转染,获得了两株稳定表达干扰片段的细胞株EC9706R8-1及EC9706R8-4.Real-time PCR检测结果发现病毒基因E6、E7均被下调.Western Blot检测结果表明在病毒蛋白E7通路中控制细胞周期的p27蛋白表达量有显著的提高.同时,E6及E7基因下调后,细胞活力也明显下降.结论 EC9706食管癌细胞系中HPV18 E7基因的沉默很可能与食管上皮细胞的癌变有关,该结果为HPV相关食管癌的基因沉默治疗研究提供了一定的理论基础.