内质网应激在高脂饲养小鼠脂肪肝形成中的作用

目的 探讨内质网应激在高脂饲养小鼠脂肪肝形成中的作用.方法 将8周雄性C57BL/6J小鼠随机分成两组:高脂饲养组(给予含60％卡路里的高饱和脂肪酸饲养)和正常对照组,饲养16周;使用高脂肪酸体外孵育原代肝细胞,模拟高脂状态;通过HE染色、苏丹Ⅳ染色反映肝组织脂质沉积情况;通过RT-PCR和Western blottling检测固醇调节元素结合蛋白(SREBP-1)和脂肪酸合成酶(FAS)基因和蛋白表达以反映肝细胞内脂质合成,检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、磷酸化真核细胞翻译启始因子2 α(eIF2α)以及增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达以反映肝细胞内质网应激.结果 肝组织HE染色可见高脂组肝细胞胞浆内充满大量脂肪空泡,苏丹Ⅳ染色可见肝细胞内存在大量大小不一的红色脂滴;过氧化物酶体增殖激活受体α(PPARα)的mRNA水平明显高于正常对照组.与正常对照组比较,高脂组肝脏内质网应激的标志蛋白GRP78、PERK、磷酸化eIF2α和CHOP等表达也明显上调.另外,用脂肪酸如油酸孵育原代培养的正常肝细胞24 ～ 72 h,亦呈时间依赖性地上调GRP78、PERK、磷酸化eIF2α和CHOP等蛋白表达,并伴有SREBP-1和FAS蛋白表达增加.结论 长期高脂饲养小鼠可导致肝脏脂肪合成与沉积增加,其机制可能与肝脏内质网应激有关.