高频双极脉冲不可逆电穿孔消融猪肝组织的安全性和有效性研究

目的 探讨高频双极脉冲不可逆电穿孔(IRE)消融猪肝组织的安全性和有效性.方法 采用实验研究方法.采用陆军军医大学实验中心巴马小型猪18只,雌雄不限,月龄为(6.8±0.8)个月,月龄范围为5.5～8.0个月.18只巴马小型猪按随机数字表法分为实验组(15只)和对照组(3只),实验组巴马小型猪行高频双极脉冲IRE消融,于消融结束后即刻、消融后第3、7、14、28天各取3只行增强CT检查后处死,取肝组织行组织病理学检查;对照组巴马小型猪行单极脉冲IRE消融,于消融后第3天行增强CT检查后处死,取肝组织行组织病理学检查.检测指标:(1)两组巴马小型猪肌肉收缩强度比较.(2)实验组巴马小型猪IRE消融后CT增强检查影像学表现.(3)实验组巴马小型猪IRE消融后组织病理学表现.(4)两组巴马小型猪IRE消融后消融区肝组织细胞凋亡指数比较.正态分布的计量资料以Mean±SD表示,组间比较采用独立样本t检验.结果 (1)两组巴马小型猪肌肉收缩强度比较:两组巴马小型猪均成功完成IRE消融.实验组巴马小型猪术中肌肉收缩强度为(9.8±0.4)m/s2,对照组为(48.6±0.5)m/s2,两组比较,差异有统计学意义(t=-163.50,P＜0.05).(2)实验组巴马小型猪IRE消融前后CT增强检查影像学表现:IRE消融结束后即刻、消融后第7天,实验组巴马小型猪CT增强检查见消融区呈低密度影,边界清晰,消融区内及其毗邻大血管未见明显异常,消融后均未出现严重并发症.随消融后时间延长,实验组消融区与正常肝组织边界逐渐模糊,消融区逐渐被正常肝组织替代,消融后第28天增强CT检查可见消融区明显缩小甚至消失.实验组巴马小型猪IRE消融后消融区最长径:消融后即刻为(1.81±0.17)cm、消融后第3天为(1.75±0.19)cm、消融后第7天为(1.32±0.22)cm、消融后第14天为(0.65±0.14)cm、消融后第28天为(0.28±0.10)cm.(3)实验组巴马小型猪IRE消融后组织病理学表现:消融后即刻,实验组巴马小型猪苏木素伊红染色组织病理学检查示消融区细胞肿胀,排列紊乱,部分针道周围可见出血;消融后第3天HE染色组织病理学检查示消融区内胆管与血管形态完整,可见大量深染细胞核、部分溶解或裂开的细胞核和凋亡小体,消融区周围可见大量炎性细胞浸润;消融后第3天血管性血友病因子染色组织病理学检查示完整的血管内皮细胞;消融后第3天原位末端标记法染色检查示消融区内大量核深染的凋亡细胞显著多于消融区外;消融后第3天Von Kossa染色检查示部分黑褐色钙盐沉积;消融后第7、14、28天均可见大量新生的肝细胞从消融区周边向中心生长,且随时间延长呈逐渐增多趋势;消融后第14、28天均可见平滑肌细胞增生;消融后第28天消融区基本被新生细胞替代.(4)两组巴马小型猪IRE消融后消融区肝组织细胞凋亡指数比较:实验组和对照组巴马小型猪IRE消融后第3天消融区肝组织细胞凋亡指数分别为76.67％±0.04％和64.03％±0.05％,两组比较,差异有统计学意义(t=4.79,P＜0.05).结论 高频双极脉冲IRE消融猪肝组织安全、有效,且比单极脉冲IRE消融更加彻底.