黄芩清热除痹胶囊含药血清对类风湿关节炎患者氧化应激及AMPK, FoxO3a蛋白表达的影响

研究黄芩清热除痹胶囊(HQC)含药血清对类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、叉头框蛋白O3a(FoxO3a)蛋白表达的影响,探讨其抗氧化作用机制.通过收集患者和正常人外周抗凝血,用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离出单核细胞(PBMC),细胞培养取对数期细胞,并用SD大鼠给药灌胃制备含药血清,分为5组[正常组、模型组、AMPK阻断剂组(compound C 10 μmol·L-1)、HQC中剂量+AMPK阻断剂组、HQC中剂量组],根据MTT法检测细胞抑制率.采用ELISA检测IL-1β,IL-4,LPO,MDA,SOD,TAOC水平;Western blot检测AMPK,p-AMPK,p-FoxO3a,FoxO3a蛋白的表达.结果 显示,HQC含药血清对外周血人单核细胞有抑制作用,中剂量HQC为最佳浓度,24 h为最佳时间.HQC中剂量组在升高SOD,p-AMPK,p-FoxO3a,降低LPO方面优于模型组、AMPK阻断剂组、HQC中剂量+AMPK阻断剂组;在升高IL-4,TAOC,AMPK,FoxO3a,降低IL-1β,MDA方面优于模型组和AMPK阻断剂组,差异具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结果 表明,HQC含药血清可能通过升高TAOC,SOD水平,降低MDA,LPO水平,激活AMPK,直接磷酸化FoxO3a增强其转录活性,改善RA患者氧化应激状态.