Purmorphamine对神经干细胞分化的影响及其机制

背景:神经干细胞的增殖及分化一直是研究的难点和热点,有效提高神经干细胞向神经细胞的分化效率具有重要的意义.据最近文献报道,小分子化合物purmorphamine在各类细胞增殖及分化实验中的应用越来越广泛.目的:探讨小分子化合物purmorphamine通过上调Shh信号通路对神经干细胞分化为各类神经细胞的促进作用.方法:从小鼠胚胎海马区分离培养得到原代神经干细胞,取第2-4代生长良好的细胞分为对照组及实验组.对照组用不添加purmorphamine的分化培养基培养,实验组用添加1 μmol/L purmorphamine的分化培养基培养.培养7,14 d后,通过免疫细胞化学、RT-qPCR方法检测神经细胞标志物的表达量.结果与结论:①体外培养的神经干细胞生长良好,神经球中的大部分细胞表达特异性标志物 nestin;②对照组及实验组均可见到TUJ1、GFAP、MAP2、MBP染色阳性;③RT-qPCR显示第7天实验组的TUJ1、GFAP、MAP2、MBP表达量均比对照组显著增高(P < 0.05);第14天实验组的Smo、Ptc1、Gli-1表达量比对照组显著增高(P < 0.05);GFAP、MAP2、MBP 的表达量也比对照组显著增高(P < 0.05);④以上数据表明purmorphmine能通过上调Shh信号通路来促进神经干细胞的分化.