通过抑制ATM上调Bim促进小脑颗粒神经元凋亡

[目的]研究抑制共济失调毛细血管扩张突变(ATM)蛋白对SD大鼠小脑颗粒神经元(CGN)凋亡的影响及机制.[方法]将原代培养7～8 d的CGN分为25 K组、5K组和ATM抑制组.分别应用含有25和5 mmol/LKCl的培养基处理25 K组和5K组,建立体外神经元存活和凋亡模型.在25 K神经元存活模型中,应用ATM抑制剂KU-55933(10 μmol/L,ATM抑制组)、KU-55933联合MithramycinA(1μmol/L,MMA组)或Chromomycin A3(0.3 μmol/L,CMA3组)处理,用Western Blot方法检测p-ATM、ATM、Bim、Caspase 3的表达水平,用Hoechst染色法观察并统计核固缩情况.[结果]Western Blot结果显示,与25 K组比较,5K组和ATM抑制组的Bim、Caspase 3蛋白表达均上调(P＜0.05).核染色结果显示,与25K组比较,5K组和ATM抑制组核固缩率均明显增多(P＜0.05).与ATM抑制组比较,MMA组和CMA3组中Bim表达、Caspase3活性及核固缩率均明显减少.[结论]抑制ATM上调Bim活性,促进小脑颗粒神经元凋亡.