抑制HDAC4减少JNK/c-Jun活性及其依赖的神经元凋亡

[目的]研究抑制组蛋白去乙酰化酶成员HDAC4对SD大鼠小脑颗粒神经元(CGNs)凋亡的影响及机制.[方法]将原代培养6～9d的CGN分为存活对照组(用含K+浓度为25 mmol/L的培养基,即25 K组)、凋亡组(用含K+浓度为5 mmol/L的培养基,即5K组)和LMK-235处理组(5K合并LMK-235处理组),在5K条件下用不同浓度HDAC4抑制剂LMK-235处理细胞.在转染实验中,将CGN分为25 K+siNC组、5 K+siNC组、5 K+siH-DAC4-1组和5 K+siHDAC4-2组,共转染GFP标记目的细胞.用Western blot法检测p-JNK、JNK、p-c-Jun、c-Jun 的表达水平,用Hoeehst染色法观察并统计核固缩情况,用免疫荧光检测c-Jun磷酸化水平.[结果]Western blot结果显示,与5K组比较,LMK-235处理细胞后JNK、c-Jun磷酸化水平下降.核染色结果显示,与25 K组比较,5K组核固缩率明显增多(P＜0.05);与5K组比较,LMK-235处理细胞后核固缩率明显减少(P＜0.05).与5K+siNC组比较,小分子干扰HDAC4后,HDAC4的表达下调,c-Jun的磷酸化水平降低,CGNs核固缩率明显减少(P＜0.05).[结论]抑制HDAC4通过下调JNK/c-Jun活性使神经元核固缩率减少,从而抑制神经元凋亡.