灵芝亲本及其杂交菌株液态发酵胞外多糖理化特征及刺激Dectin-1受体和巨噬细胞活性比较

在相同条件下分别液态发酵培养赤芝(Ganoderma lucidum)G0119、G0154及其杂交菌株GZ36,比较不同发酵时间(24、48、72、96 h)所得胞外多糖的含量、重均分子量分布特征、单糖组成特征和免疫活性差异.结果表明:3个菌株的胞外液在21～26、34～44 min时间段均出现2个峰(P1、P3),而GZ36在26～33 min时出现峰P2.在实验范围内,随着发酵时间延长,3个菌株的不同组分含量均呈现增加趋势.发酵终点72 h的胞外多糖 P1、P2、P3 的重均分子量分别为 5.193×106～8.957×106、4.437×106、6.033×104～8.148×104g·mol-1.与60％乙醇沉淀组分(60E)相比,3个菌株胞外多糖的20％乙醇沉淀(20E)组分的产量较高.与亲本菌株G0119、G0154的20E组分相比,杂交菌株GZ36的20E组分产量(0.46g·L-1)较高,其多糖含量(82.96％)也较高;3个菌株的60E组分相比,菌株GZ36、G0154的产量(0.13、0.14 g·L1)较高,菌株GZ36的多糖含量(78.76％)较高.杂交菌株GZ36胞外多糖20E组分(主要由葡萄糖组成)和60E组分(主要由木糖组成)在单糖组成和比例上更接近亲本菌株G0154.与阴性对照相比,3个菌株的胞外多糖20E组分均表现出刺激Dectin-1受体的活性;60E组分均具有诱导巨噬细胞释放NO的活性.与亲本菌株相比,在200 μg·mL-1时,杂交菌株GZ36的60E组分活性较强.研究结果为了解灵芝亲本与杂交菌株胞外多糖的异同提供参考.