连续应用特立帕肽对正常和去势小鼠骨代谢的影响

目的 探讨连续泵入特立帕肽(TPTD)对去势和正常小鼠骨代谢的影响,为研究TPTD及其相关肽破骨作用的动物模型选择提供实验依据.方法 6周龄雌性C57BL小鼠24只,分别接受去势(OVX)或者假手术(SHAM),1周后用微量泵泵入TPTD或者等量的溶剂(VEH),分成SHAM-VEH,SHAM-TPTD,OVX-VEH,OVX-TPTD四组.2周后,获取胫骨组织经显微CT测量胫骨和皮质骨相关参数.并对胫骨组织行进行组织切片HE染色和TRAP染色,统计破骨细胞数目及生长板厚度.测量小鼠血清中的钙离子浓度.取部分颅骨原代成骨细胞加雌二醇(E2)和TPTD刺激培养48 h后提取细胞总蛋白,分析β-catenin和RANKL蛋白的表达.结果 OVX小鼠的骨小梁骨量较SHAM小鼠的骨量显著减少(P<0.05).TPTD泵入显著减低SHAM小鼠松质骨骨量股骨中段皮质骨面积,与此相反,TPTD泵入增加OVX小鼠松质骨骨量,不改变皮质骨面积.TRAP染色结果发现,OVX较SHAM小鼠胫骨骨松质破骨细胞明显增多,SHAM-TPTD较SHAM小鼠增多(P<0.05).细胞学蛋白分析结果显示,E2和TPTD持续刺激48 h后,β-catenin表达量较TPTD单纯刺激降低,RANKL表达相对升高.结论 TPTD的连续应用促进正常小鼠的骨吸收,但对去势小鼠不具有明显的促骨吸收作用,去势小鼠不适用于研究TPTD及相关肽的促破骨作用.